Browsing by Author "Lopez Villafuerte, Juan Jesus"

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    Expresión y caracterización funcional de la xilanasa de Paenibacillus barengoltzii en Escherichia coli
    (Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann, 2025) Lopez Villafuerte, Juan Jesus; Castellanos Cabrera, Roberto
    Las xilanasas son enzimas importantes en la degradación de la biomasa vegetal, principalmente sobre los componentes de la hemicelulosa, permitiendo la liberación de xilooligosacáridos y xilosa. En este estudio, se logró la transformación de Escherichia coli BL21 Star (DE3) con un plásmido que contuvo el gen de la xilanasa de Paenibacillus barengoltzii. El clon más eficiente alcanzó una actividad catalítica de 1129 U/mL. Posteriormente, se realizó un escalamiento del cultivo, obteniendo valores de actividad específica de 319,84 U/mg en la fracción soluble y 2478,064 U/mg en el ultrafiltrado. La caracterización funcional de la enzima mostró una actividad máxima a 60 °C y pH 7. En cuanto a la estabilidad térmica, la enzima mantuvo más del 72 % de su actividad tras 240 minutos a 40 °C, aunque a temperaturas de 60 a 80 °C, la actividad residual decayó rápidamente. Respecto a la estabilidad frente al pH, se conservó valores entorno al 100 % de actividad residual tras 4 horas en pH 6 y 7, mientras que a pH 4 y 8, se observó una pérdida notable de actividad residual. El análisis frente a agentes químicos reveló que K⁺ mantuvo un comportamiento activador sostenido hasta 150,81 % a 10 mM. El Mn²⁺ y Cu²⁺ también incrementaron notablemente la actividad residual, alcanzando 132,64 % y 168,51 % a 1 mM, respectivamente. Estos resultados demuestran que la expresión recombinante de la xilanasa de P. barengoltzii en E. coli BL21 Star (DE3) fue exitosa, y que la enzima presenta características funcionales atractivas para su aplicación en procesos biotecnológicos en la industria alimentaria.