Tesis de Biología-Microbiología

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https://repositorio.unjbg.edu.pe/handle/20.500.12510/16

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Browsing Tesis de Biología-Microbiología by Subject "Actividad enzimática"

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    Biodecoloración de tintes sintéticos industriales por bacterias termófilas con actividad enzima tipo lacasa
    (Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann, 2017) Salazar Torreblanca, Fiorela Virginia; Castellanos Cabrera, Roberto
    En este trabajo se investigó la capacidad de decoloración de las bacterias termófilas del cepario del Laboratorio de Bioquímica con actividad enzimática tipo lacasa sobre tintes sintéticos industriales especialmente tintas de impresión que se liberan en los efluentes industriales en el momento del destintado del papel reciclado. Por tal motivo, se seleccionaron los cultivos bacterianos termófilos CB-13, CB-25, FT-6 y TM-12, que presentaron mayor actividad enzimática tipo lacasa en medio sólido para los cuatro sustratos evaluados (2-MP; 2,6 – DMP; ABTS y SRG). Y entre ellos, se eligió a TM-12 por presentar el mayor potencial para la decoloración de tintes sintéticos en pruebas de tubos de ensayo, el cual fue identificado bioquímica y molecularmente como Geobacillus sp. Durante el estudio de las cinéticas de remoción del tratamiento biológico con Geobacillus sp. TM-12, se alcanzó un porcentaje de decoloración superior al 75 % para los tintes azoicos en periodos de tiempo menores a las 24 horas; además, se observó cambios en los espectros de absorción señalando la degradación química del tinte. De la misma forma, el tratamiento del efluente de destintado simulado se logró el 60 % de decoloración a las 14 horas. Concluyendo que sí es posible la biodecoloración de tintes sintéticos durante el tratamiento biológico con bacterias termófilas con actividad enzimática tipo lacasa.
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    Influencia de las mutaciones del gen pncA de cepas de Mycobacterium tuberculosis multidrogoresistentes sobre los parámetros cinéticos y actividad enzimática de Pirazinamidasas recombinantes
    (Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann, 2019) Quispe Hualpa, Yaneth Mariluz; Cevallos Columbus, César
    La pirazinamida es un profarmaco que al ingresar a Mycobacterium tuberculosis (Mtb) y mediante la acción de la pirazinamidasa (PZAsa), enzima codificada por el gen pncA, es convertida a su forma activa, el ácido pirazinoico (POA) el cual es un tóxico y potencial inhibidor de micobacterias en estado de latencia. Las mutaciones en el gen pncA constituyen el principal mecanismo de resistencia a PZA. En este estudio, se evaluó la influencia de las mutaciones del gen pncA de cepas de Mtb multidrogoresistentes sobre los parámetros cinéticos y actividad enzimática de PZAsas recombinantes a través de técnicas de clonamiento molecular y expresión de proteínas recombinantes. Para ello, se trabajó con mutaciones (G373T, T515C, G511A y G185A) que en la estructura de las PZAsas recombinantes dan lugar a cambios de aminoácidos (V125F, L172P, A171T y P62L) alejados de los sitios catalíticos. Nuestros hallazgos de acuerdo a los análisis estadístico muestran que las mutaciones no afectaron los valores de 𝐾𝑚 (p>0.05), sin embargo, los demás parámetros cinéticos (𝐾𝑐𝑎𝑡 y 𝐸𝑓𝑓) y actividad enzimática (p<0.05) sí fueron afectados. La PZAsa con el cambio de aminoácido L172P mostró una funcionalidad (𝐾𝑐𝑎𝑡: 11 𝑚𝑖𝑛−1; 𝐸𝑓𝑓: 8.24 𝑚𝑖𝑛−1𝑚𝑀−1; actividad enzimática: 0.51 μ𝑚𝑜𝑙 𝑃𝑂𝐴∗𝑚𝑖𝑛−1∗𝑚𝑔−1𝑃𝑍𝐴𝑠𝑎) mucho menor al de las otras PZAsas y acuerdo al análisis de Tukey al compararse con la PZAsa WT H37Rv se evidenció este orden: WT H37Rv > V125F > A171T > P62L > L172P. En conclusión las mutaciones del gen pncA afectan negativamente los parámetros cinéticos (𝐾𝑐𝑎𝑡 y 𝐸𝑓𝑓) y actividad enzimática de PZAsas recombinantes.