Purificación y caracterización enzimática de la celulasa producida por Bacillus sp. aislada de los géiseres de Candarave-Tacna, 2013
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Date
2014
Authors
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Publisher
Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann
Abstract
Se purificó parcialmente y se caracterizó la enzima celulasa producida porBacillusspaislada de los géiseres de Candarave, lafase logarítmica se dio a partir de las 24 horas. La producción enzimática se determinó a partir del método de DNS. El extracto enzimático se empleó ensustratos celulósicos como tallos, hojas de geranio(Pelargoniumx hortorum), papel y CMC para evaluar su potencial de degradación, obteniéndose valores de azúcares reductores de 3,499 mg/ml;0,116 mg/ml; 0,083 mg/ml y0,593mg/mlrespectivamente. Posteriormente, se concentró por evaporación y purificó parcialmente mediante el método de precipitación de sulfato de amonio a una concentración final del 90 %. Mediante un proceso posterior de diálisis se obtuvo una actividad de 5,9 U/ml y una concentración de proteínas de 1,3 mg/ml. Los parámetros de cinética enzimática,empleando el modelo Michaelis-Menten, para Km, velocidadinicial y máxima fueron2,3 mg de CMC/ml; 0,0054mg/ml.min y 0,012 mg/ml.min respectivamente.Finalmente se evaluaronlas actividades enzimáticas a diferentes rangos de pH y temperaturas,siendo las mejores actividades3,4 U/ml a 45°C a pH 7,0; 2,5 U/ml a 25°C a pH 5,0; y 2,45 U/ml a 80 °C a pH de 10.
Description
Keywords
Celulasa, Bacillus, Enzimas, Géiseres, Candarave (prov), Tacna